PCR實驗室建設規劃方案

　　 PCR實驗室建設是一項非常複雜的係統工程，很多朋友都在網絡上試圖尋找一些詳細點的相關資料，可是非常難找到專業和詳細的文檔，今天我們就破例分享一下如此專業和詳細的PCR實驗室建設規劃方案給大家:
       PCR實驗室的核心問題是如何避免汙染，本工程實例從ＰＣＲ實驗室環境安全角度闡述如何避免汙染。ＰＣＲ實驗室需獨立區域設置，避免與外界環境的交叉汙染，從工藝平麵布局、淨化區域劃分、人物流走向和壓力壓差控製等方麵綜合闡述實驗室環境安全控製措施。

　　PCR是聚合酶鏈式反應（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ）的簡稱，是一種分子生物學技術，用於放大特定的ＤＮＡ片段，可看作生物體外的特殊ＤＮＡ複製。PCR技術的問世成了生物學界的一個熱點，特別在分子生物學和人類遺傳學等研究領域。PCR作為一項“革命性的新技術”不僅推動分子生物學及相關學科的發展，而且為相應的產業提供一片“天空”，在食品、醫學、以及其他方麵的應用都具有重要的作用。由於PCR技術的高度敏感性，ＰＣＲ技術要求髙、影響因素多，從樣品製備到結果的產生，任何一處細微的失誤均會造成結果的偏差，導致樣品的假陽性和假陰性結果。因此PCR實驗室的核心問題是如何避免汙染，本文結合工程實例主要從ＰＣＲ實驗室環境安全角度闡述如何避免汙染。

　　1.執行標準

         以下的PCR實驗室相關標準都是我們在做實驗室建設的時候必須要遵從的執行標準，而這些標準大家是可以免費在網絡上查詢到的，後續我們也會幫大家逐步收集整理起來，我們也有類似的一個相關標準的集合頁麵:實驗室設計規範與標準

　　《實驗室生物安全通用要求》國家標準ＧＢ１９４８９－２００８

　　《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規範》衛醫發［２００２］８號文

　　《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》衛醫發［２００２］１０號文

　　《臨床基因擴增檢驗實驗室設置標準》衛醫發［２００２］１０號文附件

　　《基因檢驗實驗室技術要求》國家質監檢驗總局ＳＮ／Ｔ１１９３－２００３

　　《潔淨室及相關受控環境－生物汙染控製》國際標準ＩＳＯ１４６９８

　　《潔淨廠房設計規範》國家標準ＧＢ５００７３－２０１３

　　《潔淨室施工及驗收規範》ＧＢ５０５９１－２０１０

　　《室內空氣質量標準》國家標準ＧＢ/T1８８３－２００２

　　《生物安全實驗室建築技術規範》國家標準ＧＢ５０３４６－２０１１

　　《病原微生物實驗室生物安全管理條例》衛生部（２００４－１１－12）

　　2.實驗室布局

　　在PCR實驗室研究過程中，很多操作都會產生氣溶膠，比如離心、混勻等操作。為保證環境安全，ＰＣＲ實驗室設計建造需獨立區域設置，避免與其餘環境的交叉混雜，下麵根據工程實例從平麵布局、淨化區域劃分，人物流設置和壓力壓差控製等方麵具體介紹。

　　2.1.平麵功能劃分

　　根據PCR實驗室按工藝需求及相關規定劃分為６間，分別是１試劑準備區、２標本製備區、３擴增反應一區、４純化區、5擴增反應二區、６後純化區，布局見圖１。按國家衛生部的要求，各實驗區域必須是相互獨立的，不能直通，每個獨立實驗區設有專門的閘間供工作人員換工作服和鞋，進入各工作區域必須嚴格遵循單一方向順序，即隻能從左邊試劑準備區，標本製備區，擴增反應一區，純化區，擴增反應二區到後純化區，避免發生交叉汙染。平麵布局滿足《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規範》衛醫發［２００２］８號文、《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》衛醫發［２００２］１０號文及附件《臨床基因擴增檢驗實驗室設置標準》等相關實驗室設置標準的要求。



　　2.2.淨化區域劃分

　　為避免樣本間的交叉汙染，房間采取淨化控製，總體設置為１０萬級。閘間設置為正壓區，保證與外界環境隔離，避免從鄰近區域進入本區域的氣溶膠汙染。詳見圖２。

　　2.3.人流物流設置

　　人流物流設置各行其道，避免交叉混雜，整個區域設置一個公用走廊，工作區域之間設置試劑物品傳遞專用窗，做到人物分流。

　　物流：在試劑準備區與標本製備區、標本製備區與ＰＣＲ擴增區之間，以及擴增區域和純化區之間設置有電子連鎖不鏽鋼傳遞窗，以單向進行試劑、標本等物品傳送，製的試劑通過單向傳遞窗由試劑準備區傳遞到標本製備區，處理過的標本通過單向傳遞窗由標本製備區傳遞到ＰＣＲ擴增區，按照工藝流程逐次傳遞，避免返流。單向物品傳送係統既保障了標本試劑不受汙染，又保障了標本試劑不汙染環境。

　　人流：人員通過閘間分別進入各自實驗區域，進出各實驗區域需要在閘間區域更換潔淨工作服，手消毒等。詳見圖３。

　2.4.壓力壓差設置

　　PCR實驗室應設置為負壓潔淨室，通過壓差控製，使整個ＰＣＲ實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的汙染，並且降低擴增產物對人員和環境的汙染。各個實驗室與非潔淨區之間的閘間保持正壓，＞１０Ｐａ，實驗與閘間之間的氣流組織方向為：試劑準備區空氣流向閘間，標本製備區流向閘間，而PCR擴增區氣流方向由閘間流向PCR擴增區，純化區同理；同時按照試劑單向流方向，各個實驗室之間設置不同壓力梯度來實現單向氣流組織方向，由試劑準備區、標本製備區、擴增反應一區、純化區、擴增反應二區、到後純化區壓力逐漸降低，形成單向負壓壓力梯度依次為：＋２０Ｐａ、＋１５Ｐａ、－５Ｐａ、－１０Ｐａ、－２０Ｐａ、－２５Ｐａ。詳見圖４。